灭荧灯的价格(荧光熄灭剂)

荧光熄灭剂

荧光的猝灭(熄灭)一词，从广义上说，指的是任何可使某给定荧光物质的荧光强度降低的作用，或者任何可使荧光强度不与荧光物质的浓度呈线性关系的作用。

从狭义上说，指的是荧光物质分子与溶剂分子或其它溶质分子之间的相互作用，导致荧光强度降低的现象。

荧光熄灭剂 原理

直接免疫荧光实验为什么加酒精

免疫荧光细胞化学方法的原理是根据抗原抗体反应的规律，把已知的抗原或抗体标记上荧光素，制成荧光抗原或抗体，然后以它作为探针来检测组织或细胞内的相应物质。方法具体种类有直接法、间接法、夹心法和补体法等。

1、冰冻切片制备：建议用新鲜组织，否则组织细胞内部结构破坏，易使抗原弥散。选用干净锋利的刀片、组织一定要冷冻适度等，防止裂片和脱片严重。

2、组织切片固定：切好片风干后立即用冰丙酮等固定液进行固定 5-10 min，尤其要较长时间保存的白片，一定要及时固定和适当保存。

3、血清封闭：为防止内源性非特异性蛋白抗原的结合，需要在一抗孵育前先用血清（与二抗来源一致）封闭，减弱背景着色。血清封闭的时间是可以调整的，一般 10-30 min。

4、一抗孵育条件：在免疫组化反应中最重要，包括孵育时间和抗体浓度。一抗孵育温度有几种：4℃ 、室温、37℃ ，其中 4℃ 效果最佳；孵育时间：这与温度、抗体浓度有关，一般 37℃ 1-2 h，而 4℃ 过宿和从冰箱拿出后 37℃ 复温 45 min。具体条件还要摸索。

5、二抗孵育条件：二抗一般室温或 37℃ 立即观察，若将标本放在聚乙烯塑料袋中 4℃ 30 min-1h，具体时间需要摸索，而浓度一般有工作液，若是浓缩液还要摸索浓度，切记要避光反应。但在免疫荧光中我们一般先把二抗浓度和孵育时间先定下，然后去摸索一抗浓度和孵育时间。最后，荧光素标记的二抗随着保存时间的延长，可能后有大量的游离荧光素残留，需要注意配制时小包装和并进行适当的离心。

6、复染：目的是形成细胞轮廓，从而更好地对目标蛋白进行定位。一般常用 DAPI 复染。

7、封片：为了长期保存，我们一般用缓冲甘油等封片，此外还有专门的抗荧光萃灭封片液。避免产生气泡，方法是直接在载玻片组织上滴一滴封片液，然后一手拿住盖片某一拐角，而另一手拿对面的那个拐角，接近封片液近端的拐角先降低，直至接触到液体时为止；当发现液体接触面在不断弥散时，则可以缓慢降低另一拐角，这样一般不会产生气泡。

8、切片清洗：为了防止一抗、二抗等试剂残留而引起非特异性染色，所以适当地加强清洗（延长时间和增多次数）尤为重要，我一般在一抗孵育前的清洗是 3 min*3 次，而一抗孵育后的清洗均为 5 次*5 min。注意：单独冲洗，防止交叉反应造成污染。温柔冲洗，防止切片的脱落。我喜欢用浸洗方式；冲洗的时间要足够，才能彻底洗去结合的物质。PBS 的 pH 和离子强度的使用和要求。这方面我有惨痛教训，当时我买的抗体稀释液偏酸，结果背景一片黄（未见特异性染色），建议 pH 在 7.4-7.6 浓度是 0.01 M。（中性及弱碱性条件（pH7-8）有利于免疫复合物的形成，而酸性条件则有利于分解；低离子强度有利于免疫复合物的形成，而高离子强度则有利于分解）

9、拍照：有条件的话最好立即拍照，若不能及时拍照，也要封好片和用指甲油封固，保持避光和湿度。使用荧光显微镜注意严格按照荧光显微镜出厂说明书要求进行操作，不要随意改变程序；应在暗室中进行检查；防止紫外线对眼睛的损害，在调整光源时应戴上防护眼镜；检查时间每次以1~2 h 为宜，超过 90 min，超高压汞灯发光强度逐渐下降，荧光减弱；标本受紫外线照射 3~5 min 后，荧光也明显减弱或褪色；激发光长时间的照射，会发生荧光的衰减和淬灭现象；所以最多不得超过 2~3 h；荧光显微镜光源寿命有限，标本应集中检查，以节省时间，保护光源。天热时，应加电扇散热降温，新换灯泡应从开始就记录使用时间。灯熄灭后欲再启用时，须待灯光充分冷却后才能点燃。一天中应避免数次点燃光源。关闭汞灯至少在开启 15-30 分钟后；标本染色后立即观察，因时间久了荧光会逐渐减弱。若将标本放在聚乙烯塑料袋中 4℃ 保存，可延缓荧光减弱时间，防止封裱剂蒸发；使用的玻片等载体，都必须厚度均匀，无明显的自发荧光，如果使用油镜，还必须保证镜油为无荧光镜油；电源最好装稳压器，否则电压不稳不仅会降低汞灯的寿命，也会影响镜检的效果。

荧光消除剂

1.白醋

利用白醋的反应进行去除，白醋有帮助软化荧光剂的作用，而且有杀菌的效果，使用时注意用量。

2.高温

荧光剂中含有大量的有毒物质，高温可以帮助很快的清除细菌，利用高温，可以很好的帮助去除书本上的荧光剂。

荧光促灭

在模拟人体生理的条件下,采用荧光光谱、红外光谱、紫外光谱和分子模拟的方法,研究该两种化合物与HSA的作用机制。

由不同温度下的动态猝灭常数(KSV)和作用前后蛋白质的荧光寿命,可判断两种物质对HSA的荧光猝灭均为静态猝灭。没单位。

荧光熄灭的形式有哪些途径

1、温度 　　温度对于溶液的荧光强度有着显著的影响。在一般情况下，随着温度的升高，荧光物质溶液的荧光效率和荧光强度将降低。这是因为，当温度升高时，分子运动速度加快，分子间碰撞概率增加，使无辐射跃迁增加，从而降低了荧光效率。例如，荧光素钠的乙醇溶液，在0℃以下，温度每降低10℃，在荧光效率增加3％，在—80℃时，荧光效率φf为1。　　

2、溶剂 　　同一物质在不同溶剂中，其荧光光谱的位置和强度都有差别。一般情况下，荧光波长随着溶剂极性的增大而长移，荧光强度也有增强。这是因为在极性溶剂中，π→π*跃迁需要的能量差ΔE小，而且跃迁概率增加，使紫外吸收和荧光波长均向长移，强度也增强。　　溶剂粘度减小时，可以增加分子间碰撞机会，使无辐射跃迁增加而荧光减弱。故荧光强度随溶剂粘度的减小而减弱。由于温度对溶剂的粘度有影响，一般式温度上升，溶剂粘度变小，因此温度上升荧光强度下降。　　

3、pH的影响 　　当荧光物质本身是弱酸或弱碱时，溶液的pH对该荧光物质的荧光强度有较大的影响，这主要是因为弱酸弱碱和它们的离子结构有所不同，在不同酸度中分子和离子间的平衡改变，因此荧光强度也有差异。在每一种荧光物质都有其适宜的发射荧光的存在形式，也就有相应的pH范围，一保持荧光物质和溶剂之间的离解平衡。　　苯胺在pH为7~12的溶液中主要以分子形式存在，由于—NH2为提高荧光效率的取代基，故苯胺分子会发生蓝色荧光。但在pH＜2和pH＞13的溶液中均以苯胺离子形式存在，故不能发射荧光。 4.荧光熄灭剂　　荧光熄灭又称荧光猝灭，是指荧光物质分子与溶剂分子或其它溶质分子相互作用引起荧光强度降低的现象。荧光熄灭剂可以促进这种现象的发生。　　5.散射光　　散射光对荧光测定有干扰，尤其是波长比入射光波长更长的拉曼光，因其波长与荧光波长接近，对荧光测定的干扰更大，必须采取措施消除。

荧光熄灭剂有哪些

紫光灯灭蚊子在日杂店就可以购买到。用于兔舍或鸭鸡是无毒，因为是灯管内部有紫色荧光剂，不会外泄。不用谢，希望能解决你的问题。

什么是荧光熄灭现象

硫酸的沸点很高，非常难赶酸。用原子荧光法测量的重金属消解时非常容易挥发，因此温度不能太高。

若加入硫酸几乎不能除尽，而酸度对原子荧光的影响非常大，会导致荧光值变高，因此尽管很多的标准中提到用硫酸，我们几乎不用，一般是用其他酸来代替。